為指導(dǎo)養(yǎng)豬場做好非洲豬瘟監(jiān)測工作，及時發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟病毒特別是變異株感染情況，提升非洲豬瘟防控能力，特制定本技術(shù)指南。
一 非洲豬瘟變異株的定義
非洲豬瘟變異株包括基因缺失株、自然變異株、自然弱毒株等，與2018年傳入的非洲豬瘟毒株相比，該類毒株的基因組序列、致病力等發(fā)生明顯變化。生豬感染該類毒株后，潛伏期延長，臨床表現(xiàn)輕微，后期可出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹、皮膚出血型壞死灶，感染母豬產(chǎn)仔性能下降、死淘率增高，出現(xiàn)流產(chǎn)死胎/木乃伊胎等。與傳統(tǒng)的流行毒株相比，生豬感染該類毒株后排毒滴度低、間隙性排毒，難以早期發(fā)現(xiàn)。
二 監(jiān)測方法
(一)加強(qiáng)臨床巡視
時刻關(guān)注豬場各個環(huán)節(jié)豬只異常情況，想方設(shè)法提升飼養(yǎng)人員責(zé)任心，一旦發(fā)現(xiàn)豬只出現(xiàn)嗜睡、輕觸不起、采食量減少，發(fā)熱、皮膚發(fā)紅、關(guān)節(jié)腫脹/壞死、咳喘、腹式呼吸，育肥豬死淘率增高，母豬流產(chǎn)或出現(xiàn)死胎/木乃伊胎等可疑臨床表現(xiàn)時，應(yīng)第一時間采樣檢測。
(二)改進(jìn)主動監(jiān)測
每周對豬群進(jìn)行病原和抗體檢測。在豬群進(jìn)行疫苗接種、轉(zhuǎn)群、去勢，或母豬分娩后，應(yīng)進(jìn)行采樣檢測。豬場出現(xiàn)風(fēng)險暴露或周邊豬場出現(xiàn)感染時，按需進(jìn)行采樣檢測。
(三)抽樣策略
對可疑豬的同舍和關(guān)聯(lián)舍豬群，采集深部咽拭子和抗凝血，進(jìn)行病原檢測，必要時采集血清進(jìn)行抗體檢測。對可疑豬及臨近豬接觸的地面、欄桿，以及舍內(nèi)人員接觸的物品等，采集環(huán)境樣品進(jìn)行病原檢測。病原檢測如果混檢，建議混樣數(shù)量不超過5個;抗體檢測不得混樣。
(四)樣品選擇
對可疑豬，按檢出概率高低排序，依次采集深部咽拭子、淋巴結(jié)(微創(chuàng)采集)、前腔靜脈抗凝血(EDTA)或尾根血、口鼻拭子。
對分娩母豬，應(yīng)采集臍帶血、胎衣;對死胎和流產(chǎn)胎兒，應(yīng)采集淋巴結(jié)、脾臟等組織樣品。
對病死豬，優(yōu)選采集部位為淋巴結(jié)、脾臟、骨髓和肺臟。
血清樣本，按常規(guī)方法制備。
三 檢測方法
(一)病原檢測方法
采用非洲豬瘟病毒(P72/CD2v/MGF)三重?zé)晒釶CR方法檢測核酸，詳見“農(nóng)辦牧〔2020〕39號”附件《非洲豬瘟病毒流行株與基因缺失株鑒別檢測規(guī)范》。必要時可測序鑒別。
(二)抗體檢測方法
采用間接ELISA、阻斷ELISA等方法檢測抗體水平，詳見《非洲豬瘟診斷技術(shù)》(GB/T 18648)。
一 非洲豬瘟變異株的定義
非洲豬瘟變異株包括基因缺失株、自然變異株、自然弱毒株等，與2018年傳入的非洲豬瘟毒株相比，該類毒株的基因組序列、致病力等發(fā)生明顯變化。生豬感染該類毒株后，潛伏期延長，臨床表現(xiàn)輕微，后期可出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹、皮膚出血型壞死灶，感染母豬產(chǎn)仔性能下降、死淘率增高，出現(xiàn)流產(chǎn)死胎/木乃伊胎等。與傳統(tǒng)的流行毒株相比，生豬感染該類毒株后排毒滴度低、間隙性排毒，難以早期發(fā)現(xiàn)。
二 監(jiān)測方法
(一)加強(qiáng)臨床巡視
時刻關(guān)注豬場各個環(huán)節(jié)豬只異常情況，想方設(shè)法提升飼養(yǎng)人員責(zé)任心，一旦發(fā)現(xiàn)豬只出現(xiàn)嗜睡、輕觸不起、采食量減少，發(fā)熱、皮膚發(fā)紅、關(guān)節(jié)腫脹/壞死、咳喘、腹式呼吸，育肥豬死淘率增高，母豬流產(chǎn)或出現(xiàn)死胎/木乃伊胎等可疑臨床表現(xiàn)時，應(yīng)第一時間采樣檢測。
(二)改進(jìn)主動監(jiān)測
每周對豬群進(jìn)行病原和抗體檢測。在豬群進(jìn)行疫苗接種、轉(zhuǎn)群、去勢，或母豬分娩后，應(yīng)進(jìn)行采樣檢測。豬場出現(xiàn)風(fēng)險暴露或周邊豬場出現(xiàn)感染時，按需進(jìn)行采樣檢測。
(三)抽樣策略
對可疑豬的同舍和關(guān)聯(lián)舍豬群，采集深部咽拭子和抗凝血，進(jìn)行病原檢測，必要時采集血清進(jìn)行抗體檢測。對可疑豬及臨近豬接觸的地面、欄桿，以及舍內(nèi)人員接觸的物品等，采集環(huán)境樣品進(jìn)行病原檢測。病原檢測如果混檢，建議混樣數(shù)量不超過5個;抗體檢測不得混樣。
(四)樣品選擇
對可疑豬，按檢出概率高低排序，依次采集深部咽拭子、淋巴結(jié)(微創(chuàng)采集)、前腔靜脈抗凝血(EDTA)或尾根血、口鼻拭子。
對分娩母豬，應(yīng)采集臍帶血、胎衣;對死胎和流產(chǎn)胎兒，應(yīng)采集淋巴結(jié)、脾臟等組織樣品。
對病死豬，優(yōu)選采集部位為淋巴結(jié)、脾臟、骨髓和肺臟。
血清樣本，按常規(guī)方法制備。
三 檢測方法
(一)病原檢測方法
采用非洲豬瘟病毒(P72/CD2v/MGF)三重?zé)晒釶CR方法檢測核酸，詳見“農(nóng)辦牧〔2020〕39號”附件《非洲豬瘟病毒流行株與基因缺失株鑒別檢測規(guī)范》。必要時可測序鑒別。
(二)抗體檢測方法
采用間接ELISA、阻斷ELISA等方法檢測抗體水平，詳見《非洲豬瘟診斷技術(shù)》(GB/T 18648)。
