中山大學(xué)原海洋科學(xué)學(xué)院院長(zhǎng)何建國(guó)教授
歷時(shí)超15年，疫苗研發(fā)歷程漫長(zhǎng)而艱難
水產(chǎn)前沿：獲悉何首席及您帶領(lǐng)的團(tuán)隊(duì)研發(fā)的鱖傳染性脾腎壞死病滅活疫苗獲得農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的新獸藥注冊(cè)證書(shū)，您可否談?wù)勗撘呙绲难邪l(fā)歷程？
何建國(guó)：我們知道鱖魚(yú)全國(guó)來(lái)講大約有30萬(wàn)噸，從1994年甚至更早開(kāi)始，鱖魚(yú)就一直受虹彩病毒病害的困擾，該病原我們把它命名為“傳染性脾腎壞死病毒(ISKNV)”，它主要是感染脾臟和腎臟，也感染其他組織和器官。這個(gè)病毒在發(fā)病的時(shí)候基本會(huì)導(dǎo)致90%以上的死亡，而且時(shí)間非常短，大概在7-10天之內(nèi)就會(huì)導(dǎo)致池塘70%-90%左右的魚(yú)死亡。當(dāng)初在廣東這個(gè)病池塘發(fā)生率大概在30%左右，損失非常大，沒(méi)有藥物能夠控制。
后來(lái)我們把這個(gè)病的感染途徑和傳播途徑搞清楚之后發(fā)現(xiàn)它是能夠通過(guò)水體傳播的，且與溫度、溶解氧有著直接的關(guān)系，因此我們當(dāng)初就這個(gè)病建立了一套包含苗種檢測(cè)、水體控制、餌料檢測(cè)三方面的綜合防控技術(shù)，但大家知道綜合防控對(duì)養(yǎng)殖者來(lái)講操作起來(lái)有一定難度，且有時(shí)候沒(méi)有這樣的條件。在2004年我們解決了一個(gè)很關(guān)鍵的技術(shù)問(wèn)題，就是建立對(duì)ISKNV敏感的細(xì)胞系，這個(gè)細(xì)胞系可以用牛血清培養(yǎng)，當(dāng)時(shí)在日本也有細(xì)胞系對(duì)這個(gè)病毒是敏感的，但用的是其他的非常昂貴的血清。我們用的是便宜的能夠培養(yǎng)ISKNV的敏感細(xì)胞系，因?yàn)橛辛薎SKNV敏感細(xì)胞系，我們就可以進(jìn)行大量的生產(chǎn)病毒，這是病毒疫苗研發(fā)的基本條件。
疫苗研發(fā)的整個(gè)過(guò)程還是比較漫長(zhǎng)和痛苦的。在突破了病毒敏感細(xì)胞系之后，要做到能規(guī)?；a(chǎn)，做出來(lái)的疫苗要有保護(hù)性，要求能對(duì)現(xiàn)在國(guó)內(nèi)流行的所有這種病毒的不同種株都有保護(hù)性。而且我們還做了不同的魚(yú)，除了鱖魚(yú)外，還做了石斑魚(yú)、海鱸、尖吻鱸等等這些魚(yú)類，都是有保護(hù)的，且保護(hù)效果都在90%以上。接下來(lái)我們進(jìn)行了安全性測(cè)試，看疫苗對(duì)鱖魚(yú)生長(zhǎng)有沒(méi)有影響，會(huì)不會(huì)造成副作用，并在實(shí)驗(yàn)室測(cè)試它的保護(hù)期等等。這些做完了以后我們用了幾年的時(shí)間申請(qǐng)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的臨床測(cè)試，在2014年拿到臨床的中試批文，2016年申請(qǐng)第三方復(fù)核，2019年初通過(guò)了第三方復(fù)核，最后終于在2019年12月30號(hào)拿到了新獸藥注冊(cè)證書(shū)（一類）。
廣東、江浙、江蘇、遼寧等地均取得不錯(cuò)試驗(yàn)效果
水產(chǎn)前沿：該疫苗曾在國(guó)內(nèi)哪些地方做過(guò)怎樣的養(yǎng)殖性試驗(yàn)，效果如何？
何建國(guó)：我們最早是在遼寧丹東進(jìn)行測(cè)試，測(cè)試了很多年，基本上每年都成功。那邊有很多網(wǎng)箱養(yǎng)殖斑鱖，打了疫苗的基本上都養(yǎng)殖成功了，沒(méi)打的有些發(fā)病死了。在江蘇的鱖魚(yú)池塘養(yǎng)殖打了疫苗之后試驗(yàn)效果也非常明顯，其中有一口塘是一半鱖魚(yú)苗打了疫苗，一半沒(méi)有打，那塘魚(yú)剛好發(fā)病了，活下了一半，我們認(rèn)為是打了疫苗的那一半免疫了。在廣東來(lái)講這樣的案例就比較多了，工廠化鱖魚(yú)養(yǎng)殖也有進(jìn)行試驗(yàn)，一批苗分了幾個(gè)池，其中兩個(gè)沒(méi)有打疫苗的池就陸陸續(xù)續(xù)死，打了疫苗的就沒(méi)有死，而且長(zhǎng)得也快了。不是打了疫苗促進(jìn)生長(zhǎng)，而是因?yàn)榘l(fā)病會(huì)影響魚(yú)類生長(zhǎng)，那么不發(fā)病的魚(yú)相對(duì)來(lái)說(shuō)就比發(fā)病的長(zhǎng)得快。這樣的案例，我們之前在沒(méi)有申請(qǐng)臨床批文的時(shí)候，就已經(jīng)做了大量的試驗(yàn)，效果是毋庸置疑了。
水產(chǎn)前沿：請(qǐng)問(wèn)何首席，該疫苗適用什么規(guī)格的鱖魚(yú)，接下來(lái)將如何量產(chǎn)和應(yīng)用，養(yǎng)殖戶可通過(guò)哪些渠道購(gòu)買，是否有定價(jià)？
何建國(guó)：2020年1月廣東漁躍生物技術(shù)有限公司已經(jīng)把該疫苗的使用權(quán)買下了，估計(jì)今年11月份就可以量產(chǎn)，明年就可以大規(guī)模使用了。該疫苗對(duì)5克/尾以上規(guī)格的鱖魚(yú)都是有免疫效果的，一般為了操作方便，大多選擇20克以上的鱖魚(yú)注射疫苗，如果養(yǎng)殖戶需要購(gòu)買疫苗的話可以直接聯(lián)系廣東漁躍生物技術(shù)有限公司，價(jià)格也由他們來(lái)定。
水產(chǎn)前沿：鱖魚(yú)病毒傳播有哪些渠道？垂直傳播是否存在？該如何防控？
何建國(guó)：這個(gè)病毒肯定不存在垂直傳播。首先我要說(shuō)明一個(gè)概念性錯(cuò)誤，所謂“垂直傳播”是病毒感染到卵細(xì)胞里面，卵在孵化當(dāng)中本身就感染了，這叫“垂直傳播”，其他的都不叫“垂直傳播”。比如從親魚(yú)傳到小魚(yú)，通過(guò)水體或卵表面?zhèn)鞑ザ疾唤小按怪眰鞑ァ?。親魚(yú)攜帶病毒是可以傳給小魚(yú)的，其實(shí)是環(huán)境被污染了，還是屬于水體傳播。
關(guān)于鱖魚(yú)病毒傳播的途徑，第一途徑就是買的魚(yú)苗攜帶病毒；第二就是水體傳播，其他發(fā)病的塘的水體進(jìn)到你的塘，會(huì)把你塘里的魚(yú)感染；第三就是餌料魚(yú)傳播，比如一塘鱖魚(yú)發(fā)病了，塘里的餌料魚(yú)還沒(méi)有吃完，又賣給別人，那么就很可能將病毒帶到別的魚(yú)塘去。
防控方法的話主要還是切斷傳播源，選購(gòu)魚(yú)苗的時(shí)候要先進(jìn)行檢測(cè)，水體進(jìn)來(lái)的時(shí)候要消毒處理，水體消毒是可以直接殺死病毒的，但水體消毒要強(qiáng)消毒才行。最好采用含氯制劑的消毒劑，其他類型的還不行，比如碘制劑就對(duì)病毒作用比較弱。餌料魚(yú)的話最好每批都測(cè)。不過(guò)現(xiàn)在有疫苗了，這些問(wèn)題就變得簡(jiǎn)單了，直接注射疫苗就好了。
疫苗生產(chǎn)能力能達(dá)到6億尾，市場(chǎng)接受需要過(guò)程
水產(chǎn)前沿：接下來(lái)的這個(gè)鱖魚(yú)疫苗的生產(chǎn)規(guī)模大概是怎樣的？
何建國(guó)：現(xiàn)在全國(guó)來(lái)講的話，鱖魚(yú)大約是30萬(wàn)噸，一噸按2000尾算，大約就是是6億尾。6億尾的生產(chǎn)能力完全可以，目前疫苗生產(chǎn)能力建設(shè)是能達(dá)到6億尾的，具體生產(chǎn)多少還是要看市場(chǎng)需求。如果10%的鱖魚(yú)使用疫苗的話，就是6000萬(wàn)尾，相信市場(chǎng)會(huì)慢慢認(rèn)可并接受，養(yǎng)殖戶對(duì)疫苗的使用觀念和習(xí)慣也會(huì)隨之轉(zhuǎn)變，慢慢地做到一定的覆蓋率。
水產(chǎn)前沿：關(guān)于該疫苗，接下來(lái)您和團(tuán)隊(duì)的研發(fā)計(jì)劃大概是怎樣的？
何建國(guó)：接下來(lái)首先我們要把疫苗的應(yīng)用魚(yú)類的種類范圍擴(kuò)大，目前我們已經(jīng)拿到的是鱖魚(yú)ISKNV疫苗獸藥注冊(cè)證書(shū)，雖然該疫苗對(duì)其他品種的ISKNV病毒也有保護(hù)作用，但按照我們國(guó)家的疫苗制度，我們還需要按照品種重新申請(qǐng)其他魚(yú)的ISKNV疫苗獸藥注冊(cè)證書(shū)，比如石斑魚(yú)、海鱸的等等。因此我們要擴(kuò)大魚(yú)類的范圍，這是第一。
第二，我們要搞多聯(lián)疫苗，鱖魚(yú)養(yǎng)殖過(guò)程中不止ISKNV這一種病毒，我們要建立以“魚(yú)”為核心的疫苗體系，比如說(shuō)鱖魚(yú)有其他的病毒的話我們就研發(fā)二聯(lián)苗或三聯(lián)苗，一針免疫后能預(yù)防養(yǎng)殖過(guò)程中常見(jiàn)的幾種病毒。
第三，我們現(xiàn)在這個(gè)疫苗注射起來(lái)還是有點(diǎn)麻煩，所以我們現(xiàn)在在研究基因工程的減毒疫苗（也就是浸泡疫苗）。它能夠感染，但是不致病，雖然這個(gè)比較麻煩，但我們已經(jīng)搞清楚了病毒的一些致病基因，我們把這些毒力基因敲除，就變成一個(gè)減毒的疫苗，將來(lái)浸泡就行了，這方面的進(jìn)展目前還是非常好的。這又解決了幾個(gè)問(wèn)題，一是不用注射了，采用浸泡；第二是苗期大約兩厘米就可以用疫苗了。現(xiàn)在我們已經(jīng)測(cè)試了三年了，效果非常好，尤其是在苗期，用的量也非常的少。
研發(fā)疫苗要按照國(guó)家規(guī)章制度要求的步驟，要把要研發(fā)的疫苗的流行病學(xué)搞清楚
水產(chǎn)前沿：關(guān)于該疫苗，請(qǐng)問(wèn)您還有其他的一些心得或感悟可以跟大家分享的嗎？
何建國(guó)：研發(fā)疫苗的心得的話就是首先要有技術(shù)上的突破，其次就是一開(kāi)始研究疫苗的時(shí)候，一定要按照國(guó)家申報(bào)疫苗的規(guī)定，一步一步地去實(shí)施疫苗研發(fā)計(jì)劃，否則的話在這個(gè)過(guò)程當(dāng)中可能就會(huì)有缺陷，比如安全性有缺陷，國(guó)家是不批的。所以從一開(kāi)始一定要按照國(guó)家疫苗審批的規(guī)章制度的要求去做，而不是依靠科學(xué)家自己的喜好或理解，因?yàn)橐呙绲膶徟@么多年下來(lái)，已經(jīng)形成了很科學(xué)、很規(guī)范、很嚴(yán)謹(jǐn)?shù)陌踩行У暮窈竦囊槐疽?guī)章制度。
另外，我們?nèi)珖?guó)地方這么大，一開(kāi)始就要把我們要研發(fā)的疫苗的流行病學(xué)搞清楚，要求所研發(fā)的疫苗盡可能的預(yù)防所有的流行病毒種株。如果研發(fā)的初期流行病學(xué)沒(méi)有完全搞清楚，就會(huì)影響疫苗的使用效果，所以你會(huì)發(fā)現(xiàn)有的疫苗保護(hù)率不好，或者只是一些區(qū)域有效，對(duì)其他區(qū)域無(wú)效，那就是流行株沒(méi)有調(diào)查清楚，這是非常重要的。
